高通量組織研磨儀的采用特點
高通量組織研磨儀樣品采集、制備和組織研磨。收集新鮮動物組織樣本,修剪至約 50-100 mg 濕重,在液氮中速凍,并儲存在 -80°C 低溫冰箱中。樣品取自人類、狗、貓、老鼠、牛、馬以及魚和蛤蜊。在提取 DNA 或 RNA 之前,將這些冷凍組織置于深孔板中并在干冰上冷凍。將兩個 4m 鋼球(SPEX Cat. No. 2150)放入每個孔中,并加入 500 mL 緩沖液。
用深孔板蓋密封并在高通量組織研磨儀上以每分鐘 1000 次循環(huán)研磨 2 分鐘。在 4°C 培養(yǎng) 30 分鐘后,用裂解液提取 gDNA 或總 RNA。使用高通量組織研磨儀優(yōu)化后,再使用6700全自動核酸工作站進行實時PCR,組織提取的RNA或DNA量在10-20mg之間。
高通量組織研磨儀 利用技術(shù)控制提取的 RNA/cDNA 和基因組 DNA 的質(zhì)量。為了評估提取的 RNA 的質(zhì)量,使用了產(chǎn)品合成互補。逆轉(zhuǎn)錄反應在50℃進行50分鐘,加入60μl水,加熱至95℃保持5分鐘,冰冷終止反應。
CDNA的質(zhì)量是根據(jù)內(nèi)源性控制系統(tǒng)從一定數(shù)量的組織中獲得的CT值來判斷的。值高于某個閾值的樣本表明樣本質(zhì)量受損和總 RNA 降解,需要重新提取備用樣本。為了評估 cDNA 質(zhì)量,我們通常使用針對物種特異性甘油醛-3-磷酸脫氫酶 (GAPDH) 或核糖體基因的系統(tǒng)。
為了評估提取的基因組 DNA 的質(zhì)量,開發(fā)了一種針對單拷貝基因的物種特異性系統(tǒng),以量化基因組當量和細胞數(shù)量。 概述了用于 gDNA 質(zhì)量控制的系統(tǒng)。使用針對單個復制基因的系統(tǒng),根據(jù) CT 值判斷一定數(shù)量組織的 gDNA 質(zhì)量。值高于某個閾值的樣本表明 DNA 已經(jīng)降解,需要重新提取備用樣本。該系統(tǒng)可用于靶向單拷貝假基因。
高通量組織研磨儀
超 高通量:一次可處理 576 個樣品或 16 個 50mL 樣品瓶
超 高的效率:專利垂直振蕩技術(shù),1-2分鐘完成難樣樣品的研磨均質(zhì)
高均一性:批量處理樣品,程序化處理機制,更好的均一性和重復性
更人性化:可調(diào)角度彩色觸摸顯示屏,可編輯、調(diào)用和存儲500種方法。
適用性廣:程序可調(diào),提供更多研磨瓶和研磨介質(zhì),完善滿足不同樣品的研磨混合需求
安全可靠:雙門鎖,打磨過程更安全;設置安全程序,限制查看特定方法
低溫研磨:專業(yè)的低溫組件和可調(diào)的循環(huán)程序,在整個研磨過程中保持低溫,適用于對溫度敏感的樣品
由于高通量組織研磨儀采用夾具固定球磨機,為了適應更多情況下樣品的研磨,我們可以將球磨機更換為不同的研磨平臺,如研磨粉碎藻細胞提取葉綠素A磨臺等,組裝效果如下:這里簡單介紹一下高通量組織研磨機在實驗室的使用??偟膩碚f,它的操作和使用都比較簡單。高通量組織粉碎機采用水平和橫向振動,可同時配備兩臺球磨機。運行更穩(wěn)定,振動頻率可達每分鐘1500次,采樣更細致。
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